تکثیر، کلونینگ و بیان ژن bp۲۶((omp۲۸ brucellamelitensis بومی استان مرکزی به منظور تولید پروتئین نو ترکیب bp۲۶

Authors

مریم عزیزپور مغوان

maryam azizpour department of microbiology, science and research branch, islamic azad university, arak, iranگروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اراک، ارک، ایران داود حسینی

davood hosseini razi vaccine and serum research institute, arak branch, arak, iranموسسه تحقیقات واکسن و سرم‎سازی رازی مرکزی، اراک، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی اراک (islamic azad university of arak) حسین بصیری

hossein basiri department of microbiology, islamic azad university, arak branch, arak, iranﮔﺮوه ﻣﯿﮑﺮبﺷﻨﺎﺳﯽ، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اراک، اراک، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی اراک (islamic azad university of arak) ندا اکبری

neda akbari department of microbiology, islamic azad university, arak branch, arak, iranﮔﺮوه ﻣﯿﮑﺮبﺷﻨﺎﺳﯽ، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اراک، اراک، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی اراک (islamic azad university of arak) میترا نظام آبادی

abstract

زمینه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده‎ای است که هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می‎کند. بنابراین استفاده از بهترین، دقیق‎‎‎‎‎‎ترین و به صرفه‎ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می‎باشد. عامل شایع بروسلوز در ایران بروسلا بوده و پروتئین bp26این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته خوبی دارد. بنابراین هدف از این تحقیق تولید پروتئین bp26 نوترکیب از باکتری بروسلا جهت استفاده در کیت تشخیص بروسلوز می‎باشد. مواد و روش‎ها: در این مطالعه ﺑﻨﯿﺎدی - ﮐﺎرﺑﺮدی، از باکتری کشت شده، تخلیص dna ژنومیک به روش پروتئیناز k و فنل/کلرفرم انجام شد. سپس با توجه به اطلاعات توالی ژن bp26 brucella melitensis موجود در بانک اطلاعات ژن، برای ژن مذکور پرایمر طراحی شده و واکنش زنجیره ای پلیمراز راه‎اندازی، بهینه‎سازی و انجام شد. در ادامه محصول واکنش ابتدا در وکتور ptz57r/t الحاق گردید و پس از آن در وکتور pet-28a کلون گردید. وکتور نو‎ترکیب به میزبان e. coli bl21(de3) منتقل گردید و پروتئین نوترکیب و با ستون کروماتو‎گرافی ni-nta علیه his tag تخلیص گردید. یافته‎ها: اندازه ژن تکثیر شده با اندازه بخشی از ژن bp26 brucella melitensis موجود در بانک اطلاعات ژن مطابقت داشت. ژن bp26 بدون القاء با iptg به میزان کم بیان شده و با افزودن آن به غلظت 1 میلی‎مولار به محیط کشت در ساعت سوم، حداکثر بیان مشاهده شد. نتیجه‎گیری: تولید پروتئین نوترکیب bp26 از باکتری ملیتنسیس بومی استان مرکزی با استفاده از ناقل پلاسمیدی pet-28a امکان‎پذیر گردید. با توجه به اهمیت این پروتئین و به منظور بررسی‎‎های بیشتر در آینده در خصوص تهیه کیت تشخیص بروسلوز، امکان تولید آن در کشور فراهم شد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

تکثیر ،کلونینگ و بیان ژن نوترکیب bp۲۶( omp۲۸ )باکتری b‏. melitensisجدا شده از استان مرکزی و تخلیص پروتئین bp۲۶

مقدمه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده ای است که و هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می کند . بنابراین استفاده از بهترین ، دقیق ترین و به صرفه ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می باشد . عامل شایع بروسلوز در ایران b. melitensis بوده و پروتئین bp26 این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته خوبی دارد. بنابراین هدف از این تحقیق تولید پروتئین bp26 نوترکیب از باکتریb. melitensis توسط وکتور بیانیpet-2...

full text

تکثیر ،کلونینگ و بیان ژن نوترکیب bp26( omp28 )باکتری B‏. Melitensisجدا شده از استان مرکزی و تخلیص پروتئین BP26

 مقدمه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده ای است که و هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می کند . بنابراین استفاده از بهترین ، دقیق ترین و به صرفه ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می باشد . عامل شایع بروسلوز در ایران B. melitensis بوده و پروتئین BP26 این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته خوبی دارد. بنابراین هدف از این تحقیق تولید پروتئین BP26 نوترکیب از باکتریB. Melitensis توسط وکتور بی...

full text

کلونینگ و بررسی بیان ژن کد کننده BMP-2 انسانی در باکتری E. coli به منظور تولید یک داروی نوترکیب

Introduction & Objective: Bone morphogenetic proteins are a group of cytokines that belongs to superfamily TGFβ. These proteins play an important role in evolution of many of organs and tissues through germinal period followed by amending and rebuilding of bone tissue and car-tilage. The aim of this study was to clone and expression analysis of BMP-2 gene in E. coli bacteria. Materials & Method...

full text

موتاسیون هدف مند، کلونینگ و بیان پروتئین استرپتوکیناز به منظور تولید مولکول جدید مناسب برای پگیلاسیون

زمینه و هدف: استرپتوکیناز رایج ترین و در حال حاضر مقرون به صرفه ترین داروی فیبرینولیتیک برای درمان سکته های قلبی و گرفتگی رگ ها می باشد. علی رغم مزایا و برتری هایی که استرپتوکیناز نسبت به داروهای ترومبولیتیک دیگر دارد، تجویز آن می تواند با مشکلاتی از جمله تحریک سیستم ایمنی بدن و هموراژی همراه بوده و هم چنین نیمه عمر نسبتا پایین آن منجر به درمان ناقص شود. پگیلاسیون یکی از روش های رایج برای اصلاح...

full text

کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین SNAP-25

Background & Objectives:Clostridial neurotoxin inhibits neurotransmitter release by selective and specific intracellular proteolysis of synaptosomal associated protein of 25KDa (SNAP-25), synaptobrevin/VAMP-2 and syntaxin. SNAP-25 is one of the components that forms docking complex in synaptic ends. This protein is subtrate for botulinum neurotoxins types A,C, and E. Each of these toxin serotyp...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک

جلد ۱۶، شماره ۳، صفحات ۰-۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023